Das T-SPOT.TB-Testverfahren

1 einzelnes Röhrchen. 1 Million Möglichkeiten, der Wahrheit auf die Spur zu kommen.

Die Immunantwort auf eine Infektion mit Mycobacterium tuberculosis (MTB) wird hauptsächlich durch die Aktivierung von T-Zellen nachgewiesen. Im Rahmen dieser Immunantwort werden T-Zellen auf MTB-Antigene sensibilisiert. Durch die Stimulation mit diesen Antigenen produzieren die aktivierten T-Effektorzellen, CD4+ and CD8+, das Zytokin Interferon-Gamma. Der T-SPOT.TB-Test verwendet zur Auszählung der M. tuberculosis-sensibilisierten T-Zellen die T-SPOT-Technologie, eine modifizierte Version der ELISPOT-Methode (Enzyme Linked Immunospot), bei der Interferon-Gamma in der Nähe der sezernierenden T-Zellen (CD4+ und CD8+) abgefangen wird.²

Wenn Ihr Test zum Nachweis einer TB-Infektion T-Zellen verwendet, kommt es vor allem auf die Menge an. Im Gegensatz zu anderen Tests verwendet der T-SPOT.TB-Test immer dieselbe Anzahl an T-Zellen. Und die ist hoch: 250.000 Zellen pro Vertiefung, vier Vertiefungen pro Test.² Das sind eine Million Zeugen einer TB-Infektion – die Stunde der Wahrheit im Hinblick auf TB.

Schritt 1

Mittels einer routinemäßigen Blutentnahme und eines Standard-Blutentnahmeröhrchens wird eine Blutprobe entnommen, aus der eine Untergruppe von weißen Blutkörperchen, auch periphere mononukleäre Blutzellen (PBMC) genannt, isoliert wird. Diese Zellen werden gewaschen, gezählt und standardisiert, um eine standardisierte Zellsuspension zu erstellen.

Schritt 2

Eine Standardzahl an Zellen wird in speziell entwickelte Platten gegeben und mit den TB-spezifischen Antigenen ESAT-6 und CFP10 stimuliert. Zellen, die auf diese Antigene reagieren, setzen Interferon-Gamma frei.

Schritt 3

Interferon-gamma wird von membranständigen Antikörpern abgefangen, sobald es von den Zellen freigesetzt wird. Ein weiterer enzymmarkierter Antikörper wird hinzugefügt, der sich an das membrangebundene Interferon-gamma bindet.

Schritt 4

Ein Nachweisreagenz wird hinzugegeben und reagiert mit dem enzymmarkierten Antikörper. Bei der Reaktion werden Spots erzeugt, die einen Fußabdruck der Stelle darstellen, an der Interferon-Gamma freigesetzt wurde. Diese Spots werden dann gezählt.

Jeder einzelne Schritt des Tests kann jetzt automatisiert werden. Gestalten Sie Ihren gesamten Arbeitsablauf effizienter, verringern Sie den Arbeitsaufwand und vereinfachen Sie Arbeitsanweisungen – mit unseren flexiblen modularen Automatisierungslösungen.

Die manuellen Pipettierschritte bei der Vorbereitung der Testplatten lassen sich automatisieren